Получение рекомбинантных мембранных белков для структурно-динамических исследований

Spinus 2013 Бочарова О. В. Получение рекомбинантных мембранных белков для структурно-динамических исследований методом гетероядерной ЯМР-спектроскопии В настоящее время для получения белковых продуктов с помощью технологии рекомбинантных ДНК часто используют Escherichia coli. Это связано с тем, что генетические, молекулярно-биологические, биохимические и физиологические свойства этого микроорганизма детально изучены. Также данная система экспрессии относительно недорога и проста в применении. Методы конструирования различных векторов и подбора стратегий экспрессии белков хорошо изучены и не очень сложны по сравнению с эукариотическими системами. Все это делает систему E.coli подходящей для использования в структурно-динамических исследований белков, в том числе методом гетероядерной ЯМР-спектроскопией, требующей селективное или тотальное мечение белков 2H, 13C и 15N изотопами. В то же время, следует помнить, что у бактериальной системы продукции белков есть ряд недостатков.